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固相萃取

固相萃取(Solid-Phase Extraction,簡稱SPE)是近年發(fā)展起來一種樣品預處理技術,由液固萃取柱和液相色譜技術相結合發(fā)展而來,主要用于樣品的分離、純化和濃縮,與傳統(tǒng)的液液萃取法相比較可以提高分析物的回收率,更有效的將分析物與干擾組分分離,減少樣品預處理過程,操作簡單、省時、省力。廣泛的應用在醫(yī)藥、食品、環(huán)境、商檢、化工等領域。
固相萃取
基本原理
固相萃取(Solid Phase Extraction,簡稱SPE)是從20世紀80年代中期開始發(fā)展起來的一項樣品前處理技術。由液固萃取和液相色譜技術相結合發(fā)展而來。主要用于樣品的分離,純化和富集。主要目的在于降低樣品基質干擾,提高檢測靈敏度。

SPE技術基于液-固相色譜理論,采用選擇性吸附、選擇性洗脫的方式對樣品進行富集、分離、凈化,是一種包括液相和固相的物理萃取過程;也可以將其近似地看想簽婆作一種簡單的色譜過程。

SPE是利用選擇性吸附與選擇性洗脫的液相色譜法分離原理。較常用的方法是使液體樣品溶液通過吸附劑,保留其中被測物質,再選用適當強度溶劑沖去雜質,然后用少量溶劑迅速洗脫被測物質,從而達到快速分離凈化與濃縮的目的。也可選擇性吸附干擾雜質,而讓被測物質流出;或同時吸附雜質和被測物質,再使用合適的溶劑選擇性洗脫被測歡寒朵物質。

固相萃取法的萃取劑是固體,其工作原理基于:水樣中欲測組分與共存干擾組分在固相萃取劑上作用力強弱不同,使它們彼此分離。固相萃取劑是含C18或C8、腈基、氨基等基團的特殊填料。

操作步驟
針對填料保留機理的不同(填料保留目標化合物或保留雜質),操作稍有不同。

固相萃取操作一般有四步(見圖1):

1、填料保留目標化合物

活化——除去小雅套循立柱內的雜質并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。

上樣——將樣品用一定的溶劑溶解,轉盛察簽移入柱并使組分保留在柱上。

淋洗——最大程度除去干擾物。

洗脫——用小體積的溶劑將被測物質洗脫下來并收集。

2、填料保留雜質

固相萃取操作一般有三步(見圖2):

活化——除去柱子巴碑碑頁內的雜質并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。

上樣——將樣品轉移入柱,此時大部分目標化合物會隨樣品基液流出,雜質被保留在柱上,

故此步驟要開始收集

洗脫——用小體積的溶劑將組分淋洗下來并收集,合并收集液。

此種情況多用于食品或農殘分析中去除色素。

特點
相對于傳統(tǒng)的液液萃取法和蛋白沉淀法,固相萃取具有無可比擬的優(yōu)勢,具體如下:

凈化方法: LLE(液液萃取)

優(yōu)點: 無需特殊裝置

缺點:

1、操作繁瑣,費時

2、需要耗費大量的有機溶劑,導致高成本和對環(huán)境的污染

3、難以從水中提取高水溶性物質

凈化方法:ppT(蛋白沉淀)

優(yōu)榜循點: 操作簡單,無需特殊裝置

缺點:

1、非特異性的沉淀反應可能使微量的分析物隨著基質蛋白質共同沉淀而損失。

2、凈化效果較弱,檢測靈敏度和可靠性低。

SPE(固相萃取)

優(yōu)點:

1、可同時完成樣品富集與凈化,大大提高檢測靈敏度

2、比液液萃取更快,更節(jié)省溶劑, 可自動化批量處理

3、重現性好

缺點:

1、使用進口固相萃取小柱成本較高

2、需要專業(yè)人員協(xié)助進行方法開發(fā)

簡要過程
1、一個樣品包括分離物和干擾物通過吸附劑;

2、吸附劑選擇性的保留分離物和一些干擾物,其他干擾物通過吸附劑;

3、用適當的溶劑淋洗危企腳吸附劑,使先前保留的干擾物選擇性的淋洗掉,分離物保留在吸附劑床上;

4、純化、濃縮的分離物從吸附劑上淋洗下來。

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